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        同詹姆士城峽谷病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家

        產(chǎn)品簡(jiǎn)介

        同詹姆士城峽谷病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家
        上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
        PPP1R1A檢測(cè)試劑盒雙抗體夾心ELISA法一次實(shí)驗(yàn)需要3.5-4小時(shí),競(jìng)爭(zhēng)ELISA法一次實(shí)驗(yàn)需要2-2.5小時(shí)

        更新時(shí)間:2021-03-14
        訪(fǎng)問(wèn)次數(shù):359
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        注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

         產(chǎn)品名稱(chēng)

         同詹姆士城峽谷病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家

         英文名稱(chēng)

         Jerry Slough Virus(JSV,) RTPCR

         貨號(hào)

         LZP6898

        實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
        一、試劑準(zhǔn)備
        1. DNA模板
        2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
        4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
        三、注意事項(xiàng)
        1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
        2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
        3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
        4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測(cè)步驟:
        一、 試劑的準(zhǔn)備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
        試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
        熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
        7.2 qPCR反應(yīng)條件
        將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
        組成及試劑配制:
        1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
        2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
        可可堿83-67-0*Anti-SLC39A2 Antibody研究領(lǐng)域  神經(jīng)生物學(xué) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 鋅指蛋白 表觀遺傳學(xué)

        薟精醇5940-00-1實(shí)驗(yàn)方法Anti-SLC39A7 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 神經(jīng)生物學(xué) 內(nèi)分泌病

        野馬追內(nèi)酯B877822-40-7實(shí)驗(yàn)方法Anti-SLC39A7 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 內(nèi)分泌病

        獐牙菜苷14215-86-2價(jià)格Anti-SLC43A1 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 內(nèi)分泌病

        羅漢果皂苷Ⅲe 88901-37-5 實(shí)驗(yàn)方法Anti-SLC3A2 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 生長(zhǎng)因子和激素 內(nèi)分泌病

        BOC-N-β-Trityl-L-天門(mén)冬酰胺保存Anti-SLC39A9 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)

        轉(zhuǎn)〖鐵〗蛋白實(shí)驗(yàn)步驟Anti-SLC4A1AP Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) Alzheimer's

        DEAE瓊脂糖凝膠CL-6B價(jià)格Anti-SLC4A1AP Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) Alzheimer's

        地塞米松價(jià)格Anti-SLC39A9 Antibody研究領(lǐng)域  神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞粘附分子 細(xì)胞骨架 細(xì)胞外基質(zhì) Alzheimer's

        派洛寧Y使用說(shuō)明書(shū)Anti-SLC52A1 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 表觀遺傳學(xué)

        考馬斯亮藍(lán)R250價(jià)格Anti-SLC4A1AP Antibody研究領(lǐng)域  心血管 神經(jīng)生物學(xué)

        橙黃Ⅱ價(jià)格Anti-SLC52A1 Antibody研究領(lǐng)域  免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 激酶和磷酸酶 表觀遺傳學(xué)

        酸性偶氮紅實(shí)驗(yàn)步驟Anti-SLC52A2 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

        磷鎢酸使用說(shuō)明書(shū)Anti-SLC52A2 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) Alzheimer's

        檸檬酸〖鐵〗價(jià)格Anti-SLC5A2 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 表觀遺傳學(xué)

        0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉湯(TSB-YE)Anti-Sema3A   尿囊素

        鼠李糖發(fā)酵管Anti-Sema3F   耐斯糖

        木糖發(fā)酵管Anti-Sema4C   牛血清白蛋白

        革蘭氏染色液anti-SFRP1  牛磺鵝去氧膽酸

        3%過(guò)氧化氫溶液Anti-SGC   尼奧林

        綿羊血瓊脂基礎(chǔ)Anti-SGLT1   尿素

        培養(yǎng)基Anti-Shank1  標(biāo)準(zhǔn)品

        無(wú)菌脫纖維綿羊血Anti-SHBG   鳥(niǎo)苷

        血瓊脂平板Shiga-like toxin IIe variant subunit A[Escherichia coli]  L-鳥(niǎo)氨酸鹽酸鹽

        動(dòng)力培養(yǎng)基Anti-SHP-1   鳥(niǎo)嘌呤
        同詹姆士城峽谷病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家Benzylmagnesium chloride solution,2.0 ...通用試劑 100ML

        3-Fluorophenylmagnesium bromide solution通用試劑 25ML

        4-Fluorophenylmagnesium bromide solution通用試劑 100ML

        Candelilla wax通用試劑 250G

        bees wax通用試劑 250G

        Paraffin wax通用試劑 500G

        Carnauba wax通用試劑 250G

        Methyl 2-ami-3,5-dibromobenzoate,98%通用試劑 5G

        Methyl 3-ami-2-thiophenecarboxylate,...通用試劑 5G

        DL-N-Acetylhomocysteine thiolactone,99%通用試劑 5G

        Wang Resin吸附樹(shù)脂 5G

        Amberlyst A21 free base吸附樹(shù)脂 250G

        Amberlyst 15 ion-exchange resin吸附樹(shù)脂 250G

        Amberlite IRP-69吸附樹(shù)脂 250G

        Amberlite IRA-900吸附樹(shù)脂 250G

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