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        當(dāng)前位置:首頁  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測試劑盒  -  50T禽結(jié)核桿菌PCR檢測試劑盒規(guī)格

        禽結(jié)核桿菌PCR檢測試劑盒規(guī)格

        產(chǎn)品簡介

        氟芐基肼

        富組氨酸糖蛋白(HRG)ELISA試劑盒HBA1/Alpha globin 血紅蛋白α1100 ul

        富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)ELISA試劑盒hHb 血紅蛋白100 ul

        富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61/CCN1)ELISA試劑盒HBsAg 肝表面抗原

        更新時(shí)間:2021-03-13
        訪問次數(shù):443
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        注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

         產(chǎn)品名稱

         禽結(jié)核桿菌PCR檢測試劑盒規(guī)格

         規(guī)格

         50T

         貨號

         LZP7732

        組成及試劑配制:
        1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
        2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
        ?
        實(shí)驗(yàn)過程:
        一、試劑準(zhǔn)備
        1. DNA模板
        2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
        4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
        三、注意事項(xiàng)
        1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
        2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
        3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
        4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
        甲合次硫酸氫鈉(>98%,BC)Phospho-BMAL1 (Ser42) Antibody2--氟

        酸性品紅鈣(>60%,BS)Symmetric Di-Methyl Histone H3 (Arg8) (E1W5H) Rabbit mAb(2-羥基)酸

        加拉銨(>98%,BR)Acetyl-Histone H4 (Lys12) (D2W6O) Rabbit mAb氧化

        D-氨基葡萄糖硫酸鈉鹽INTS9 Antibody氫醌

        葡萄糖-6-酸脫氫酶Na Channel β1 Subunit (D4Z2N) Rabbit mAb嗎啉酸鹽酸鹽

        戊二酸(>98%,BR)Prestained Proin Marker4'-氟-2-羥基酮

        戊二酸酐(>96%,BR)Prestained Proin Marker2--4,6-二基嘧啶

        三醋酸甘油酯(>98%,BR)Prestained Proin Marker7-溴-1H-吲唑

        甘氨酸鈉(>98%,BR)DEK (E1L3V) Rabbit mAb甲基吡啶-N-氧化物

        (>98%,BR)Na Channel β2 Subunit (D6L5Y) Rabbit mAb1-基環(huán)戊

        硬脂酸單甘油酯(>98%,BR)Tri-Methyl-Histone H3 (Lys9) (D4W1U) Rabbit mAbN-[基-(三氟甲基)基]甲基環(huán)氧酰

        化金Tri-Methyl-Histone H3 (Lys9) (D4W1U) Rabbit mAb(2S)-(+)-縮水甘油基對甲磺酸酯

        石墨粉(>99%,BR)LMAN1 (E2B6H) Rabbit mAb硝基-溴

        硝酸胍(分子生物學(xué)級)MDR1/ABCB1 (E1Y7S) Rabbit mAb溴丁

        己二(>98%,BR)Claudin-1 (D3H7C) Rabbit mAb2-基-4,5-咪唑二羧酸二甲酯

        六甲基酰三(>98%,BR)Viperin (D5T2X) Rabbit mAbN-基正丁

        還原茚三酮二水合物(>98%,BR)Acetyl-Histone H3 (Lys18) (D8Z5H) Rabbit mAb6-氧基-2-巰基并噻唑

        (>40%,BC)Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-氟芐基肼

        富組氨酸糖蛋白(HRG)ELISA試劑盒HBA1/Alpha globin  血紅蛋白α1100 ul

        富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)ELISA試劑盒hHb  血紅蛋白100 ul

        富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61/CCN1)ELISA試劑盒HBsAg  肝表面抗原100 ul

        副腫瘤性天皰瘡(PNP)ELISA試劑盒HBsAg  型肝炎表面抗原(檢測)100 ul

        復(fù)制蛋白A(RPA-70)ELISA試劑盒HBcAg  型肝炎核心抗原100 ug

        附睪蛋白4(HE4)ELISA試劑盒HBeAg(1)  肝e抗原(1)100 ul

        輔酶Q10(CoQ10)ELISA試劑盒HBeAg(2)  型肝炎e抗原(2)100 ul

        脯氨酸肽酶(PEPD)ELISA試劑盒VWCE  VWCE100 ul

        脯氨酸羥化酶(PHD)ELISA試劑盒VWCE  VWCE100 ul
        禽結(jié)核桿菌PCR檢測試劑盒規(guī)格卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體Juncusol 2-O-glucoside中文名:別名:分子式:C24H28O7

        卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體Ethyl brevifolincarboxylate中文名:短葉蘇木酚酸乙酯別名:分子式:C15H12O8

        卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白58抗體cis-Martyside中文名:順式地黃苷別名:分子式:C31H40O15

        卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白94抗體Gnetifolin E中文名:別名:分子式:C21H24O9

        卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白82抗體2',6'-Dihydroxy-4'- methoxy-3'-methylacetophene中文名:別名:分子式:C10H12O4
        檢測步驟:
        一、 試劑的準(zhǔn)備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
        試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
        熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
        7.2 qPCR反應(yīng)條件
        將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

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