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        黃頭病毒PCR檢測試劑盒說明書

        產(chǎn)品簡介

        黃頭病毒PCR檢測試劑盒說明書
        上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
        蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體

        γ -GBL)(standard for GC,≥99.9%(GC))Phospho-CrkII (Tyr221) AntibodyMicrocephalin 1/BRIT1 小腦癥基因1/認知相關(guān)蛋白抗體

        1-己烯(Standard for GC)PD-1 (D7D5W) XP&#174; Rabbit mAb

        更新時間:2021-03-13
        訪問次數(shù):468
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        組成及試劑配制:
        1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
        2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
        注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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         產(chǎn)品名稱

         黃頭病毒PCR檢測試劑盒說明書

         英文名稱

         Yellow Head Virus(YHV)RTPCR

         貨號

         LZP7479

        實驗過程:
        一、試劑準(zhǔn)備
        1. DNA模板
        2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
        4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
        三、注意事項
        1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
        2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
        3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
        4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
        一、 試劑的準(zhǔn)備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
        試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
        熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
        7.2 qPCR反應(yīng)條件
        將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
        Octyltrimethylammonium chloride亮抑酶酞 ≥90% (HPLC漆黃素 98%

        SB3-8L-亮氨酸芐酯對甲苯磺酸鹽 98%高良姜素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%

        SB3-10D-亮氨酸甲酯鹽酸鹽 98%藤黃酸 97% (HPLC)

        Benzyltrimethylammonium bromideD-亮氨酸芐酯對甲苯磺酸鹽 98%京尼平甙  分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%

        3-(2-Amiethylami)propyldimethoxymethylsilaneBoc-Lys(Boc)-ONp 97%銀杏內(nèi)酯B 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%(HPLC)

        Polyquaternium-10Boc-Lys(Z)-OSu 98%銀杏內(nèi)酯 C 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%

        THAMN-(叔丁氧羰基)-D-賴氨酸  98%沒食子酸,一物 AR,98.5%

        BIS-TRIS propaneN-[(9H-芴-9-甲氧基)羰基]-N'-[(2-烯氧基)羰基]-L-賴氨酸  95%人參皂甙 Rb2 分析標(biāo)準(zhǔn)品

        TRIS-HC1N-芴甲氧羰基-N'-[1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代環(huán)己基亞甲基)-3-甲人參皂甙 Rh2 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%

        TRIS acetate saltZ-丁氧羰基賴氨酸 98%人參皂甙 Rg1 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%

        Tris carbonateH-Leu-2-Chlorotrityl Resin 0.3~0.8 mmol/g, 100~200 mesh人參皂甙 Rg2 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%

        CAPSH-Lys(Boc)-2-Chlorotrityl Resin 0.3~0.8 mmol/g, 100~200 mesh人參皂甙 Rg3 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%

        CAPSOFmoc-Leu-Wang resin 100-200 mesh, Substitution 0.3-0.8mmol/g人參皂甙 Rc  分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%

        CAPSO sodium saltFmoc-Lys(Boc)-Wang resin 100-200 mesh, 1%DVB人參皂甙 Rd  分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%

        CAPS Sodium saltL-亮氨酸-4-胺 99%人參皂甙 Re 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%

        PIPESL-亮氨酸叔丁酯鹽酸鹽 98%人參皂苷Rh1 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%

        2,3-二甲基丁烷(Standard for GC,>99.5%(GC))HGK AntibodyMIDN  中腦核仁蛋白抗體

        (Standard for GC)AQP2 AntibodyMidkine  中期因子/肝素結(jié)合生長因子抗體

        甲酸(Standard for GC,>99%)Phospho-HSP90α (Thr5/7) AntibodyMID2/RNF60/Midline-2  環(huán)指蛋白60抗體

        呋喃(standard for GC,≥99.5%(GC))MSK1 (C27B2) Rabbit mAbMID1/Midline-1/RNF59  環(huán)指蛋白59抗體

        正庚烷(Standard for GC,>99.5%(GC))Phospho-Stat3 (Ser727) (D4X3C) Rabbit mAbMICS1  生長激素誘導(dǎo)跨膜蛋白抗體(源性蛋白2)

        正庚(Standard for GC,>99.5%(GC))Phospho-Stat3 (Ser727) (D4X3C) Rabbit mAbMicrosporidia protien  蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體

        γ -丁(GBL)(standard for GC,≥99.9%(GC))Phospho-CrkII (Tyr221) AntibodyMicrocephalin 1/BRIT1  小腦癥基因1/認知相關(guān)蛋白抗體

        1-己烯(Standard for GC)PD-1 (D7D5W) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific) (Alexa Fluor® 488 Conjugate)MICB  MHC I類鏈相關(guān)蛋白B

        正己烷(Standard for GC,>99.5%(GC))CrkII AntibodyMICA/MHC I  MHC I類鏈相關(guān)蛋白A/組織相容性復(fù)合物1抗體

        六氯乙烷(Standard for GC, ≥99.5% (GC))RIP (D94C12) XP® Rabbit mAbMIC1/C18orf8  結(jié)腸癌相關(guān)蛋白MIC1抗體
        黃頭病毒PCR檢測試劑盒說明書異戊烯焦磷酸1抗體Euonymine中文名:別名:分子式:C38H4718

        胰島素誘導(dǎo)基因1抗體1-O-Acetyl-6α-O-(2-methylbutyryl)britannilactone中文名:別名:1-Acetoxy-6α-(2-methylbutyryloxy)eriolalide分子式:C22H32O6

        胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7抗體2α,9α,11-Trihydroxy-6-oxodrim-7-ene中文名:別名:分子式:C15H24O4

        胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6抗體Ustusol A中文名:別名:分子式:C15H24O4

        IgLON家族蛋白5抗體1-O-Acetylbritannilactone中文名:1-O-乙酰基大花旋覆花內(nèi)酯別名:Inulicin分子式:C17H24O5

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