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        當(dāng)前位置:首頁(yè)  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測(cè)試劑盒  -  50T剛果錐蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

        剛果錐蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

        產(chǎn)品簡(jiǎn)介

        剛果錐蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格
        上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
        AFA/snoRNP/U3RNP檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性

        更新時(shí)間:2021-03-13
        訪(fǎng)問(wèn)次數(shù):337
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        注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

         產(chǎn)品名稱(chēng)

         剛果錐蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格

         英文名稱(chēng)

         Trypanosoma congolensePCR

         貨號(hào)

         LZP7432

        實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
        一、試劑準(zhǔn)備
        1. DNA模板
        2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
        4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
        三、注意事項(xiàng)
        1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
        2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
        3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
        4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測(cè)步驟:
        一、 試劑的準(zhǔn)備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
        試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
        熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
        7.2 qPCR反應(yīng)條件
        將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
        組成及試劑配制:
        1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
        2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
        dGTP,3Naβ-氨酸乙酯鹽酸鹽 98%2,6-二氯苯 98%

        dGTP,4NaL-精氨酸叔丁酯 98%2,6-二氯苯甲 99%

        2′-DiN'-對(duì)甲苯磺酰基-L-精氨酸 98%2,6-二氟苯  98%

        dIMPL-天冬氨酸-β-甲酯鹽酸鹽 98%2,6-二氟苯甲酰胺  97%

        dITP,3NaN-乙酰-L-苯氨酸 99%2,6-二氯甲苯 99%

        2-dTN-乙酰-DL-色氨酸 98%苯駢三氮唑 99%

        TMPNω-(4-甲氧基-2,3,6-三磺酰基)-L-精氨酸 98%苯駢三氮唑 CP,97%

        dTDPL-氨酸甲酯鹽酸鹽 98%D-海藻糖,無(wú) 99%

        TTPN-乙酰-L-亮氨酸 98%木瓜蛋白酶 ≥3 units/mg

        dTTP,4NaN-乙酰-DL-亮氨酸 98%D-(+)-海藻糖 二合物  from Saccharomyces cerevisiae, ≥99%

        2′-DuD-3-(2-萘基)-氨酸 98%D-海藻糖,二 分析標(biāo)準(zhǔn)品

        dUMPL-3-(2-萘基)-氨酸 97%D-海藻糖,二 用于細(xì)胞和昆蟲(chóng)細(xì)胞培養(yǎng), ≥99%

        dUTP,3Na血管緊張素I 97%D-海藻糖,二 用于植物細(xì)胞培養(yǎng), ≥99%

        dUTP,4NaD-氨酰-D-氨酸 99%肌酸,一 BR

        BDUH-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-絲氨酸-OH  ≥95% (HPLC)無(wú)肌酸 98%

        5-BrU精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸 97%肌酐 99%

        鄰氯苯酚(標(biāo)準(zhǔn)品)Progesterone Receptor A/B (C89F7) Rabbit mAbNAGP8  干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子NAGP8抗體

        鄰氯苯酚(Standard for GC,>99.5%(GC))Phospho-M-CSF Receptor (Tyr809) AntibodyNag  胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體

        4-氯-2-胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-M-CSF Receptor (Tyr723) (49C10) Rabbit mAbNALP6  富含亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體

        敵草索(標(biāo)準(zhǔn)品)Progesterone Receptor B (C1A2) Rabbit mAbNALP4  癌/抗原58抗體

        1-氯辛烷(標(biāo)準(zhǔn)品)IFN-γ (3F1E3) Mouse mAbNALP2/PAN1/PYPAF2  富含亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體

        二乙烯三胺(Standard for GC,>99%(GC))Phospho-PDGF Receptor β (Tyr751) AntibodyNALP12  NALP12抗體

        N,N-二胺(standard for GC,≥99.5%(GC))PDGF Receptor β AntibodyNAIP  神經(jīng)細(xì)胞凋亡抑制蛋白抗體

        十二烷(標(biāo)準(zhǔn)品)PDGF Receptor α AntibodyNAIF1 protein  核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1

        (≥99.5% (GC))cGAS (D3O8O) Rabbit mAb (Mouse Specific)Nadrin  神經(jīng)細(xì)胞發(fā)育相關(guān)調(diào)控蛋白抗體

        鉍標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L,基體: 5%H3)Zap-70 (D1C10E) XP® Rabbit mAbNADPH  還原型輔酶Ⅱ抗體
        剛果錐蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格絲裂原活化蛋白激酶3抗體Azithromycin dihydrate中文名:阿奇霉素二物別名:分子式:C38H72N2O12

        雌激素受體β 抗體8-Azaguanine中文名:8-氮雜鳥(niǎo)嘌呤別名:分子式:C4H4N6O

        上皮特異性抗原抗體2,2'-Anhydro-5-methyluridine中文名:2,2'-O-脫-5-甲基尿嘧啶核苷別名:分子式:C10H12N2O5

        內(nèi)皮素-1抗體6-Benzyloxyindole中文名:6-芐氧基吲哚別名:分子式:C15H13

        天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗體S-2-Benzothiazolyl2-ami-alpha-(methoxyimi)-4-thiazolethiolacetate中文名:AE活性酯別名:分子式:C13H10N4O2S3

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