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        產(chǎn)品中心

        Product Center

        當(dāng)前位置:首頁  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測試劑盒  -  50T羊血吸蟲PCR檢測試劑盒廠家

        羊血吸蟲PCR檢測試劑盒廠家

        產(chǎn)品簡介

        羊血吸蟲PCR檢測試劑盒廠家
        上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
        HGV-IgM檢測試劑盒以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械

        更新時間:2021-03-13
        訪問次數(shù):558
        詳細(xì)介紹在線留言

        注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

         產(chǎn)品名稱

         羊血吸蟲PCR檢測試劑盒廠家

         英文名稱

         Schistosoma mattheei,PCR

         貨號

         LZP7282

        組成及試劑配制:
        1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
        2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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        實驗過程:
        一、試劑準(zhǔn)備
        1. DNA模板
        2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
        4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
        三、注意事項
        1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個的PCR實驗室。
        2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
        3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
        4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
        Ocotillone4-基聯(lián)苯 97%Ph試紙 1-14

        Odoratone頻那 99%大口三角燒瓶 500ml

        Ohchinin acetate對苯二甲 98%直三口燒瓶 500ml

        Ohchinin對苯二甲 CP具塞三角燒瓶 500ml

        (Z)-23-Coumaroylhederagenin鄰 98%茄型燒瓶 500ml 24口 磨口

        Olean-12-ene-3,11-diol亞磷酸三乙酯 98%茄型燒瓶 250ml 24口 磨口

        Olean-12-ene-3,11-dioneN-乙基哌 98%短管標(biāo)準(zhǔn)漏斗 40mm

        Olean-12-ene-3,24-diol1-乙基哌啶 98%短管標(biāo)準(zhǔn)漏斗 75mm

        Olealic acid-3-O-beta-D-glucopyrasyl (1→2)-alpha-L-arabipyrasideN-(2-羥乙基)乙二胺 99%短管標(biāo)準(zhǔn)漏斗 150mm

        Olealic acidN-(2-羥乙基)哌 98%茄形燒瓶 100ml/24#

        Onjisaponin B高哌 98%直口三角燒瓶 1000ml

        Pachymic acid2-甲基哌 98%直三口燒瓶  250ml/24#,24#,24#

        Palbine1-甲基哌 99%直三口燒瓶  1000ml/24#,24#,24#

        Panaxadiol無哌 99%塑料量杯  5L

        Panaxatriol鈉 CP,98.0%塑料量杯  2L

        Pedunculoside氫化鈉 80%洗耳球  90ml

        2'-脫氧胞苷-5'-二磷酸三鈉鹽(分子生物學(xué)級)PSD93 (D4Z4D) Rabbit mAbPhospho-NF2(Ser518)  磷酸化2型神經(jīng)纖維瘤抗體

        (>98%,BR)DMAP1 (D4O2G) Rabbit mAbphospho-NF1(Ser2817)  磷酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體

        DMPSimpleChIP® Human DMD Intron 2 Primersphospho-NF1(Ser2515)  磷酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體

        沒食子酸月桂酯(>98.5%,BR)F4/80 (BM8.1) Rat mAb (APC-Cy7® Conjugate)phospho-NEK9(Thr210)  磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶NEK9抗體

        dUMP;2'-脫氧尿苷-5'-磷酸二鈉鹽α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAbPhospho-NEDD4L (Ser342)  磷酸化泛素連接酶NEDD4-2抗體

        乙胺鹽酸鹽(>98%,BR)α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAbPhospho-NDRG1 (Thr346)  磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體

        呋喃三二鈉鹽ST14/Matriptase AntibodyPhospho-NDRG1 (Ser330)  磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體

        3-吲哚基-beta-D-吡喃葡萄糖苷(>98%,BR)BST2 (D5V5Z) Rabbit mAbphospho-NDEL1(Thr219)  磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體

        氧化鑭(>99%,EP)Arginase-2 Antibodyphospho-NDEL1(Ser242)  磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體

        氯化鎂六(分子生物學(xué))PCSK7 (D4I5G) Rabbit mAbphospho-NDEL1(Ser231)  磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體
        羊血吸蟲PCR檢測試劑盒廠家小鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT,避光25克

        小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

        小鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT25克

        小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

        小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

        小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

        小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

        小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克
        檢測步驟:
        一、 試劑的準(zhǔn)備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
        試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
        熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
        7.2 qPCR反應(yīng)條件
        將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

         

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