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        產(chǎn)品中心

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        黑色普雷沃菌PCR檢測試劑盒價(jià)格

        產(chǎn)品簡介

        黑色普雷沃菌PCR檢測試劑盒價(jià)格
        上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
        BV檢測試劑盒 取適量組織塊,于預(yù)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用

        更新時(shí)間:2021-03-13
        訪問次數(shù):454
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        注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

         產(chǎn)品名稱

         黑色普雷沃菌PCR檢測試劑盒價(jià)格

         英文名稱

         Prevotella melaninogenicaPCR

         貨號(hào)

         LZP7181

        組成及試劑配制:
        1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
        2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
        ?
        實(shí)驗(yàn)過程:
        一、試劑準(zhǔn)備
        1. DNA模板
        2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
        4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
        三、注意事項(xiàng)
        1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
        2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
        3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
        4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
        1-nalN,N'-羰基二咪唑 99%8-氨基-1-萘酚-3,6-二磺酸單鈉鹽 CP,95.0%

        2-nallN,N'-琥珀酰亞胺基碳酸酯 98%8-氨基-1-萘酚-3,6-二磺酸單鈉鹽 80%

        1-Octadecal1,2-二甲基咪唑 99%聚氧乙烯  average Mv 100,000, powder

        1-Hexadecal4,5-二基咪唑 98%聚氧乙烯  average Mv ~300,000, powder

        1-Pentadecal咪唑 99.5%,用于緩沖溶液聚氧乙烯  average Mv ~600,000, powder

        Tetradecal咪唑 99.5%,用于熒光分析聚氧乙烯  average Mv ~900,000, powder

        Cyclohexal咪唑 99.5%,分子生物學(xué)級(jí)聚氧乙烯  average Mv ~1,000,000, powder

        2,5-Dimethylcyclohexal咪唑 99%聚氧乙烯  average Mv ~2,000,000, powder

        3,5-Dimethyl-3-hexal1-甲基咪唑 99%聚氧乙烯  average Mv ~4,000,000, powder

        3-Methylcyclohexal1,1-硫代羰基二咪唑 95%聚氧乙烯  average Mv ~5,000,000, powder

        Farnesol1,1-硫代羰基二咪唑 90%聚氧乙烯  average Mv ~7,000,000, powder

        1-Heptal2,6-二硝苯 98%1-乙基-(3-二甲基氨基基)碳二亞胺鹽酸鹽 98.5%

        n-Octal2,6-二硝苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品, 用于環(huán)境分析1-羥基-苯并-三氮唑(無) 99%

        Terpineol2,4-二硝苯 CPL-叔亮氨酸 99%

        THFA3-氨基吡唑 98%2-羥基-4-正辛氧基二苯甲酮 99%

        Cyclopental4-(氯甲基)苯甲酰氯 98%抗氧劑1076 98%

        西他塞坦鈉/司他生坦鈉4F2hc/CD98 (D6O3P) Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgM/RBITC  羅丹明標(biāo)記的兔抗羊IgM

        西他塞坦鈉/司他生坦鈉AMPA Receptor 1 (GluA1) (D4N9V) Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的兔抗羊IgM

        西他塞坦鈉/司他生坦鈉IL-17F (D3M4D) Rabbit mAb (Mouse Specific)Rabbit Anti-Goat IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgM

        輪環(huán)藤寧四乙酸/1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸BAP1 (D1W9B) Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgM/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗羊IgM

        拉米夫定Methyl-NF-κB p65 (Lys310) AntibodyRabbit Anti-Goat IgM/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgM

        拉米夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)Golgin-97 (D8P2K) Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgM/PE  PE標(biāo)記的兔抗羊IgM

        鹽酸三氟拉DC-SIGN (D7F5C) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgM/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗羊IgM

        鹽酸三氟拉(標(biāo)準(zhǔn)品)SOD2 (D9V9C) Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgM/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗羊IgM

        皮質(zhì)甾酮/腎上腺酮Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)Rabbit Anti-Goat IgM/FITC  FITC標(biāo)記的兔抗羊IgM

        皮質(zhì)甾酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Syk (D3Z1E) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-Goat IgM/Cy7  Cy7標(biāo)記的兔抗羊IgM
        黑色普雷沃菌PCR檢測試劑盒價(jià)格人胃蛋白酶(PP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT250克

        人胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:5克

        人胃蛋白酶原C(PG-C)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:10克

        人胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT500毫升

        人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT1克

        人胃泌素細(xì)胞抗體(GCA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃1克

        人胃抑素(GIP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

        人胃粘液素(GM)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:5克
        檢測步驟:
        一、 試劑的準(zhǔn)備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
        試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
        熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
        7.2 qPCR反應(yīng)條件
        將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

         

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