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        當(dāng)前位置:首頁(yè)  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測(cè)試劑盒  -  50T綿羊腺病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

        綿羊腺病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

        產(chǎn)品簡(jiǎn)介

        綿羊腺病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
        上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
        GSK2檢測(cè)試劑盒申購(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌返呐?hào)要與新頒布標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌放?hào)相符;

        更新時(shí)間:2021-03-13
        訪問(wèn)次數(shù):569
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        組成及試劑配制:
        1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
        2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
        注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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         產(chǎn)品名稱(chēng)

         綿羊腺病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

         英文名稱(chēng)

         Ovine AdenovirusPCR

         貨號(hào)

         LZP7095

        實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
        一、試劑準(zhǔn)備
        1. DNA模板
        2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
        4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
        三、注意事項(xiàng)
        1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
        2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
        3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
        4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測(cè)步驟:
        一、 試劑的準(zhǔn)備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
        試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
        熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
        7.2 qPCR反應(yīng)條件
        將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
        Staurosporine from Streptomyces sp.β-萘胺標(biāo)準(zhǔn)溶液 分析標(biāo)準(zhǔn)品,10 ng/μl丁位癸內(nèi)酯 98%

        Triclosanβ-萘胺 分析標(biāo)準(zhǔn)品鄰甲氨基苯甲酸甲酯 98%

        Trimethoprim1-萘磷酸 99%位癸內(nèi)酯 98%

        Trimethoprim lactate salt煙堿 異構(gòu)體總量:99%()鄰甲氨基苯甲酸甲酯 ≥98%, FCC, Kosher

        Tunicamycin from Streptomyces lysosuperficus氯草定 分析標(biāo)準(zhǔn)品正癸 98%

        Valimycin順-6-壬烯  95%1,4-二甲氧基苯 99%

        Zeocin油   ≥99% (GC)一縮二 99%

        (-)-Lobeline hydrochloride十八 standard for GC, ≥99.5% (GC)一縮二 98%

        Epivir-HBV3-辛酮  Standard for GC, ≥99.5% (GC)癸 97%

        Moxifloxacin hydrochloride2-辛基-4-異噻唑啉-3-酮 分析標(biāo)準(zhǔn)品2,5-二甲基吡 98%

        Moxifloxacin1-十八烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.5% (GC)丁位十二內(nèi)酯 98%

        (±)-Verapamil hydrochloride消草磺靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙酸癸酯  98%

        Glimepiride草酸 ≥99.9999% (metals basis)乙酸二甲基原酯 99%

        Chrysin四十八烷 Standard for GC,≥99.0% (GC)乙酸二原酯 98%, FCC, Kosher

        Chlorpheniramine maleateα-氧代-2-呋喃乙酸 97%2,6-二甲基-2-庚 99%

        6-APA奧美拉唑癸酸乙酯 99%

        頭孢曲松鈉IRF-3 (D9J5Q) Mouse mAbSEI2/SERTAD2  調(diào)控周期蛋白依賴(lài)蛋白激酶SEI2抗體

        頭孢曲松鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-EGF Receptor (Tyr1068) Blocking PeptideSecurin/PTTG  垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因抗體

        頭孢他啶(含碳酸鈉)IRAK1 (D51G7) Rabbit mAb (Biotinylated)SECTM1  分泌和跨膜蛋白1抗體

        頭孢唑啉鈉Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)Secretin receptor  分泌素受體抗體

        頭孢唑啉鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-Akt (Ser473) Blocking PeptideSecretin  分泌素抗體

        酸氟替卡松Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) Blocking PeptideSEC14 like protein 2/Squalene transfer protein  α維生素E相關(guān)蛋白抗體

        酸氟替卡松(標(biāo)準(zhǔn)品)S6 Ribosomal Protein Blocking PeptideSDHD  線粒體琥珀酸脫氫酶D抗體

        哌拉西林鈉Zap-70 Blocking PeptideSDHC  琥珀酸細(xì)胞色素亞基B560抗體

        哌拉西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) Blocking PeptideSDHB  鉻細(xì)胞瘤患者抑癌基因SDHB抗體

        環(huán)吡司胺; 環(huán)吡酮胺Phospho-EGF Receptor (Tyr1173) Blocking PeptideSDHA  琥珀酸脫氫酶復(fù)合體亞基A抗體
        綿羊腺病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)人降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

        人降解加速因子(DAF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

        人膠原吡啶交聯(lián)(PYD)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

        人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

        人膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

        人膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

        人膠原凝集素(Collectin)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

        人膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

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