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        同病毒綿羊膿皰病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家

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        同病毒綿羊膿皰病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家
        上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
        α1-AT檢測(cè)試劑盒嚴(yán)格規(guī)范操作,保證標(biāo)準(zhǔn)的可靠傳遞,并保證其可溯源性和準(zhǔn)確性

        更新時(shí)間:2021-03-13
        訪問(wèn)次數(shù):509
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        注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

         產(chǎn)品名稱

         同病毒綿羊膿皰病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家

         英文名稱

         Ovine Ecthyma Virus(Orf)PCR

         貨號(hào)

         LZP7098

        組成及試劑配制:
        1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
        2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
        ?
        實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
        一、試劑準(zhǔn)備
        1. DNA模板
        2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
        4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
        三、注意事項(xiàng)
        1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
        2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
        3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
        4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
        B9撲草凈標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=4%乙酸葉酯 98%

        Ethephon撲草凈 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%乙酸葉酯 ≥98%, FCC, FG

        IUPAC聚乙二二烯酸酯 平均分子量 ~258 反式-2-己烯 97%

        IAA-Na聚乙二二烯酸酯 平均分子量~575正己 98%

        IPA聚乙二二烯酸酯 平均分子量 ~700 正庚 97%

        IPA-K聚乙二甲基烯酸酯 平均分子量 ~300正庚 standard for GC, ≥98% (GC)

        IUPAC聚乙二甲基烯酸酯 平均分子量 ~475反-2-己烯酸  99%

        IBA-K聚乙二甲基烯酸酯 平均分子量~950己酸葉酯 98%

        NAAMw 400,000-500,000 ,20 wt. %溶液,800-1000 cP (25 °C) 反式-2-己烯 98%

        NAA-K鹽酸巴馬汀 97% 反式-2-己烯 ≥98%, FCC, FG

        β-Naphthaleneacetic acidN-苯基-1-萘胺 98%反-3-己烯-1- 97%

        Triacontal異硫酸苯酯 99%, 蛋白測(cè)序級(jí)惕各酸葉酯 97%

        Maleic Hydrazide酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品惕各酸葉酯 97%,Kosher

        Maleic hydrazide potassium salt聚乙烯硫酸鹽 平均分子量 Mw ~170,0002-辛基環(huán)戊酮  98%

        Diphenylcartazide5-磷酰核糖-1-焦磷酸鈉鹽 80%2-己基環(huán)戊酮 98%

        Betaine HC1氯菊酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品苯甲酸葉酯 97%

        非諾貝特PhosphoPlus® EGFR (Tyr1068) Antibody DuetSCN1B  鈉離子通道β1抗體

        非諾貝特(標(biāo)準(zhǔn)品)PSMA2 (D3A4) Rabbit mAbSCN1A  SCN1A抗體

        磺舒Phospho-Bad (Ser112) (40A9) Rabbit mAb (PE Conjugate)SCN11A/NAV1.9  鈉通道蛋白11α抗體

        磺舒(標(biāo)準(zhǔn)品)NBC1/SLC4A4 AntibodySCN10A/NAV1.8  鈉通道蛋白10α抗體

        諾氟沙星Phospho-GIT2 (Tyr392) (D8N9A) Rabbit mAbSclerostin  骨形態(tài)發(fā)生抑制蛋白SOST抗體

        諾氟沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)Upf2 (D3B10) Rabbit mAbSCHIP1/IQCJ  IQCJ抗體

        諾氟沙星鹽酸鹽UBE2S (D5H9H) Rabbit mAbSCHAD/HADHSC(mouse, rat)  短鏈L-3羥烷基輔酶A脫氫酶抗體(小鼠,大鼠)

        諾氟沙星鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)SignalSilence® MDR1/ABCB1 siRNA ISCHAD/HADHSC  短鏈L-3羥烷基輔酶A脫氫酶抗體

        吲哚美辛Phospho-HS1 (Tyr397) (D12C1) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)SCGB3A1  結(jié)合珠蛋白家族3A1抗體

        吲哚美辛(標(biāo)準(zhǔn)品)Cdc45 (D7G6) Rabbit mAbSCG3/SgIII  分泌粒蛋白3抗體
        同病毒綿羊膿皰病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家人金屬蛋白2(MT2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:50克

        人晶體蛋白α(Cryα)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

        人晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

        人精氨酸加壓素(AVP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500毫升

        人精氨酸酶(Arg)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT1克

        人巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:保存:-20℃100毫克

        人巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:保存:-20℃100毫克

        人巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT5盒
        檢測(cè)步驟:
        一、 試劑的準(zhǔn)備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
        試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
        熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
        7.2 qPCR反應(yīng)條件
        將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

         

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