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        產(chǎn)品中心

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        當前位置:首頁  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測試劑盒  -  50T*線蟲通用PCR檢測試劑盒廠家

        *線蟲通用PCR檢測試劑盒廠家

        產(chǎn)品簡介

        *線蟲通用PCR檢測試劑盒廠家
        上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
        ADAM10檢測試劑盒 細胞培養(yǎng):血清、培養(yǎng)基、平衡鹽溶液、輔助添加試劑、細胞檢測試驗。

        更新時間:2021-03-13
        訪問次數(shù):566
        詳細介紹在線留言

        注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

         產(chǎn)品名稱

         *線蟲通用PCR檢測試劑盒廠家

         英文名稱

         Nematodirus spp.PCR

         貨號

         LZP7058

        組成及試劑配制:
        1、酶標板:一塊(96孔)
        2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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        實驗過程:
        一、試劑準備
        1. DNA模板
        2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
        4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
        三、注意事項
        1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
        2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
        3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
        4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
        L-Prolil大鼠前脂肪細胞*培養(yǎng)基聚乙二單甲 平均分子量1000

        Creatine大鼠成骨細胞*培養(yǎng)基蒽酮 AR

        N-Acetyl-L-Valine大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞*培養(yǎng)基N-乙酰-D-半乳糖胺,合 98%

        N-Acetyl-DL-tryp tophane大鼠胎兒成纖維細胞*培養(yǎng)基偶氮二甲酸二異酯 95%

        N-Acetyl-glycine大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞*培養(yǎng)基偶氮二甲酸二叔丁酯 98%

        D-Tryptophan methyl ester hydrochloride大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細胞*培養(yǎng)基4,4-二溴聯(lián)苯  98%

        L-Cysteine methyl ester hydrochloride大鼠表皮角質(zhì)形成細胞*培養(yǎng)基3'-羥基苯乙酮 98%

        D-Phenylalanine methyl ester hydrochloride大鼠皮下脂肪細胞*培養(yǎng)基硫酸新霉素 USP級,680 I.U./mg

        L-Alanine methyl ester hydrochloride大鼠內(nèi)臟脂肪細胞*培養(yǎng)基土霉素  97%

        D-Alanine Methyl Ester Hydrochloride大鼠表皮黑色素細胞*培養(yǎng)基異酸苯酯 99%()

        D-Proline methyl ester hydrochloride大鼠腦動脈血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基鄰硝苯 99%

        L-Tyrosine methyl ester hydrochloride大鼠腦動脈血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基對硝苯 99%

        D-Tyrosine Methyl ester hydrochloride大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基間硝苯 CP

        D-Leucine methyl ester hydrochloride大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基間硝苯 分析標準品

        D-Serine methyl ester hydrochloride大鼠腦膜細胞*培養(yǎng)基間硝苯 standard for GC, ≥99.5% (GC)

        D-Valine methyl ester hydrochloride大鼠神經(jīng)元細胞*培養(yǎng)基間硝苯標準溶液 1000μg/ml,溶劑:甲

        氫氯噻(標準品)TNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta)  腫瘤壞死因子-β抗原surface layer protein  乳酸細菌表面蛋白抗體

        醋酸TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1)  腫瘤壞死因子α誘導蛋白1抗原SUR1  磺酰脲類藥物受體1抗體

        醋酸(標準品)Acetylated-P53(Lys382) peptide  抗腫瘤P53抗原SUPT16H/CDC68  染色體特異性轉(zhuǎn)錄延伸因子抗體

        鹽酸伊達比星TP I (topoisomerase I )  拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗原SUMO-1/UBC9  泛素蛋白連接酶E2I抗體

        甲磺酸伊馬替尼TOPO II Alpha/DNA TP II Alpha (DNA topoisomerase II Alpha)  DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗原SUMO 1  類泛素蛋白抗體

        甲磺酸伊馬替尼(標準品)TPH (Trptophan Hydroxylase)  色氨酸羥化酶(多肽)SULT2A1  膽鹽磺基轉(zhuǎn)移酶

        咪喹莫特TRA16 (Testicular orphan nuclear receptor-4 (TR4)-associated protein)  激素受體相關(guān)蛋白/孤兒素受體相關(guān)蛋白(抗原)SULT1E1/Estrogen Sulfotranferase  雌激素硫酸轉(zhuǎn)移酶抗體

        咪喹莫特(標準品)TRADD(TNF receptor 1 associated via death domain)  有死亡區(qū)的腫瘤壞死因子受體1相關(guān)蛋白抗原SULT1A1  芳基磺基轉(zhuǎn)移酶1抗體

        伊立替康TRAF1  腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗原Sulfatase 2  硫酸酯酶2蛋白抗體

        伊立替康(標準品)TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2)  腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗原Sulfatase 1  硫酸酯酶1抗體
        *線蟲通用PCR檢測試劑盒廠家人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT500克

        人膽酸(CA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500克

        人彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT1克

        人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:保存:-20℃100毫克

        人蛋白C(ProteinC)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:5克

        人蛋白S(ProteinS)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:0.25毫升

        人蛋白Z(ProteinZ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT5克

        人蛋白二化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃100毫升
        檢測步驟:
        一、 試劑的準備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
        試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
        熒光PCR反應液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
        7.2 qPCR反應條件
        將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

         

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