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        人鼻病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家

        產(chǎn)品簡介

        人鼻病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家
        上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
        MSTN檢測(cè)試劑盒洗滌去除未反應(yīng)的生物素化酪胺后,加入信號(hào)擴(kuò)增試劑II與復(fù)合物的多個(gè)生物素位點(diǎn)結(jié)合

        更新時(shí)間:2021-03-14
        訪問次數(shù):355
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        注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

         產(chǎn)品名稱

         人鼻病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家

         英文名稱

         Human Rhinovirus 9 9 PCR

         貨號(hào)

         LZP6866

        組成及試劑配制:
        1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
        2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
        ?
        實(shí)驗(yàn)過程:
        一、試劑準(zhǔn)備
        1. DNA模板
        2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
        4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
        三、注意事項(xiàng)
        1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
        2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
        3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
        4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
        貓黃體生成素(LH)elisa試劑盒Anti-RBM6 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 腫瘤細(xì)胞生物標(biāo)志物

        猴分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)elisa試劑盒Anti-RBM34 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 心血管 腫瘤細(xì)胞生物標(biāo)志物

        裸鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)elisa試劑盒Anti-RBM26 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 腫瘤細(xì)胞生物標(biāo)志物

        類人猿免疫球蛋白G4(IgG4)elisa試劑盒Anti-RBM5 Antibody研究領(lǐng)域  免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 干細(xì)胞 Alzheimer's

        蝌蚪睪酮(T)elisa試劑盒Anti-RBMS3 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 鋅指蛋白

        大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞說明書Anti-RBP5 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 細(xì)胞周期蛋白 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

        大鼠雪旺細(xì)胞價(jià)格Anti-RBSN Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 激酶和磷酸酶

        小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞說明書Anti-RBMX Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué)

        小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-RBP5 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 細(xì)胞周期蛋白 激酶和磷酸酶

        FO(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)價(jià)格Anti-RBMX Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 細(xì)菌及病毒 細(xì)胞粘附分子

        H4-II-E-C3(大鼠肝癌細(xì)胞 )現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-RBX1 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白偶聯(lián)受體

        NCI-H2087(人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞)說明書Anti-RCVRN Antibody研究領(lǐng)域  免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

        SV40 MES 13(小鼠腎小球系膜細(xì)胞)現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-RCBTB1 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 生長因子和激素 G蛋白偶聯(lián)受體

        DMEM高糖 (不含L-谷氨酰胺、丙酮酸鈉、Ca2+,含雙抗)價(jià)格Anti-RCL1 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞粘附分子

        槲皮素117-39-5價(jià)格Anti-RDM1 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 表觀遺傳學(xué)

        溶菌酶(2000 萬 IU/g)Anti-MAG-a/L-MAG   甲酸

        0.1%溶菌酶溶液Anti-MAGE-1/HLA-A1 protein   

        乙酸亞溶液Anti-MAPKK1   金合歡素

        戊烷脒多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)Anti-MAPKK2   長春瑞濱

        戊烷脒溶液Anti-Matriptase  枸櫞酸血根堿

        無菌脫纖維綿羊血Anti-MBP   長春質(zhì)堿

        培養(yǎng)基Anti-MCP-1   標(biāo)準(zhǔn)品

        營養(yǎng)肉湯Anti-M-CSF   7-甲氧基

        革蘭氏染色液Anti-MDM2   甲基麥冬黃烷酮A

        菌種培養(yǎng)基Anti-Megsin/SER—PINB7  甲基麥冬黃烷酮B
        人鼻病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒英文名稱:Rat urokinase plasmigen activator,uPA ELISA Kit*

        大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Urokinase-type Plasmigen Activator Receptor,PLAUR/uPAR ELISA Kit*

        大鼠檸檬酸合酶(CS)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Citrate synthase,CS ELISA Kit*

        大鼠凝聚素(CLU)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Clusterin,CLU ELISA Kit進(jìn)口/分裝

        大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Gelsolin ELISA Kit進(jìn)口/分裝

        大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒英文名稱:Rat thrombin-antithrombin complex,TAT ELISA Kit進(jìn)口/分裝小鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒      組裝/原裝

        小鼠酸性成纖維細(xì)胞生長因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒      組裝/原裝

        小鼠絲酸/蘇酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒      組裝/原裝

        小鼠通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒      組裝/原裝         
        檢測(cè)步驟:
        一、 試劑的準(zhǔn)備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
        試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
        熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
        7.2 qPCR反應(yīng)條件
        將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

         

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