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        當前位置:首頁  -  產品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測試劑盒  -  50T松鼠猴皰疹病毒PCR檢測試劑盒說明書

        松鼠猴皰疹病毒PCR檢測試劑盒說明書

        產品簡介

        松鼠猴皰疹病毒PCR檢測試劑盒說明書
        上海聯(lián)祖生物相關產品:
        NHE3檢測試劑盒使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致ELISA實驗結果偏差

        更新時間:2021-03-14
        訪問次數:501
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        注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

         產品名稱

         松鼠猴皰疹病毒PCR檢測試劑盒說明書

         英文名稱

         Herpesvirus Saimiri(HVS)PCR

         貨號

         LZP6839

        組成及試劑配制:
        1、酶標板:一塊(96孔)
        2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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        實驗過程:
        一、試劑準備
        1. DNA模板
        2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
        4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
        三、注意事項
        1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
        2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
        3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
        4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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        人雌二醇Elisa Kit說明書Anti-Phospho RGS16 (Tyr168) Antibody研究領域 信號轉導

        人可溶性血管內皮細胞粘附分子-1Elisa KitAnti-Phospho RRN3 (Ser649) Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 細胞凋亡

        人唾液粘蛋白Elisa Kit多少錢Anti-Phospho SH3BP2 (S427) Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 神經生物學 信號轉導 細胞凋亡 激酶和磷酸酶

        人細胞間粘附分子1Elisa Kit品牌Anti-Phospho SLC12A5 (KCC2) (Ser940) Antibody研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 信號轉導

        吐溫 20Polysorbate 20Anti-ET-1  番瀉苷D

        蛋白胨溶液anti-ets1/E26    覆盆子酮

        動物組織胃蛋白酶消化物Peptic digest of animal tissueAnti-Eukaryotic aspartyl protease  風信子素

        大豆-酪蛋白消化物瓊脂培養(yǎng)基Soybean-Casein Digest-Agar MediumAnti-EV71  蜂斗菜內酯A

        EuGOYn LT 100 肉湯基礎EuGOYn LT 100 Broth BaseAnti-EXPB-2death inducer-obliterator-2  法卡林二

        EuGOYn LT 100 瓊脂培養(yǎng)基基礎EuGOYn LT 100 Agar Medium BaseAnti-Fabp2  肥皂草素

        培養(yǎng)基Anti-FABP   標準品

        LT 100 瓊脂基礎LT 100 Agar BaseAnti-factor VIII  伏格列波糖

        卵磷脂多價胨稀釋液基礎Lecithin PolysorbaPDiluentAnti-FADD   佛司可林

        改良 Letheen 瓊脂基礎Letheen Agar ModifiedAnti-FAM3B/PANDER  非洲防己堿
        松鼠猴皰疹病毒PCR檢測試劑盒說明書組織磷酸二酯酶1(PDE1)活性熒光定量檢測試劑盒10次*

        組織磷酸二酯酶1(PDE1)活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測試劑盒10次*

        組織磷酸二酯酶(PDE)總活性熒光定量elisa試劑盒    20次    *

        組織磷酸二酯酶(PDE)總活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量elisa試劑盒    20次    *

        組織亮氨酸(leucine)含量高效液相色譜法定量elisa試劑盒    20次    *

        組織亮氨酸(leucine)含量比色法定量elisa試劑盒    20次    *

        組織鋰(lithium)酶連續(xù)循環(huán)反應比色法定量elisa試劑盒    20次    *

        組織鋰(lithium)化學比色法定量檢測試劑盒50次*
        檢測步驟:
        一、 試劑的準備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
        試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
        熒光PCR反應液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
        7.2 qPCR反應條件
        將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

         

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